Цитологическое исследование и его значение в онкологии
Что такое цитологическое исследование
Цитологическое исследование — одно из самых востребованных в онкологии. С его помощью врач оценивает состояние клеточных элементов и делает заключение о злокачественной или доброкачественной природе новообразования. Изучаются особенности строения клеток, клеточный состав органов, тканей, жидкостей организма человека. Цитологическое исследование применяется при диагностике предраковых заболеваний и злокачественных новообразований различных органов: шейки и тела матки, молочной железы, щитовидной железы, легких, кожи, мягких тканей и костей, желудочно-кишечного тракта, лимфатических узлов и др. Для цитологического исследования берут мазки свода влагалища и шейки матки, мокроту, мочу, экссудаты из полостей и т.д.
Когда назначается цитологическое исследование?
В большинстве случаев врачи – терапевты, гинекологи, онкологи и другие специалисты — прибегают к цитологической диагностике при подозрении на опухолевое заболевание.
Цитологический метод применяется для исследования новообразований в различных органах – кожа, молочная железа, лёгкие, средостение, печень, почки, забрюшинные образования, щитовидная железа, предстательная железа, яичко, яичники, лимфатические узлы, миндалины, слюнные железы, мягкие ткани, кости и др.
Наибольшее распространение цитологические исследования получили в области гинекологии. Это доступный и быстрый метод скрининга, доказавший свою эффективность в диагностике предраковых заболеваний и раннего рака шейка матки.
Нередки случаи, когда цитологическое исследование помогало обнаружить рак желудка, легкого, мочевого пузыря и др. на самых ранних стадиях, когда рентгенологические и эндоскопические исследования не выявили изменений.
В период лечения опухолевого заболевания необходимо постоянно контролировать эффективность проводимой терапии. Для этого необходимы быстрые и эффективные методы диагностики. Цитологическое исследование в этих случаях позволяет оперативно получить ответы на большинство возникающих у врачей вопросов по поводу течения болезни. Цитологическое исследование широко используется также и после окончания специализированного (хирургического, химиотерапевтического или лучевого) лечения для контроля течения заболевания и раннего выявления возможного рецидива или прогрессирования опухоли (исследование лимфатических узлов, плеврального экссудата и т.д.).
Основные области применения цитологических исследований в онкологии:
В чем отличие цитологии от гистологического исследования?
Отличие цитологического исследования от гистологического, в первую очередь, заключается в том, что изучаются именно клетки, а не срезы тканей. Для гистологического исследования требуется либо операционный материал, либо забор материала методом трепан-биопсии. Для цитологического же исследования достаточно мазка со слизистой оболочки, соскоба с поверхности опухоли или материала, полученного тонкой иглой.
Подготовка гистологического препарата требует больше усилий и времени, нежели подготовка для цитологического анализа.
Как выполняется цитологическое исследование?
Для анализа используют различный биоматериал.
Эксфолиативный материал, то есть полученный методом «слущивания»:
Пункционный материал:
Операционный материал:
Эндоскопический материал:
Цитологическое исследование — наиболее щадящий метод диагностики. Обычно забор материала для анализа протекает безболезненно, в амбулаторных условиях, без травматического воздействия на органы и ткани.
Взятый для анализа клеточный материал в цитологической лаборатории переносят на предметные стекла, окрашивают и исследуют под микроскопом.
Цитоморфолог использует в своей работе совокупность признаков атипии клетки, критически оценивая их наличие и степень выраженности. Результат анализа напрямую зависит от профессионализма специалиста, проводящего исследование: как в части подготовки материала, так и в части его исследования под микроскопом.
На поверхности опухолевых клеток есть особые белки – антигены. Причем, каждая опухоль экспрессирует свой собственный набор антигенов. При необходимости с помощью специальных реактивов для иммуноцитохимического исследования врач-цитолог может не только установить наличие злокачественно трансформированных клеток в исследуемом образце, но и определить гистотип опухоли, ее органную принадлежность, факторы прогноза и чувствительность к лечению.
Достоинства цитологического метода:
Обычно для проведения исследования требуется несколько часов. Интраоперационное цитологическое исследование может быть выполнено в течение 10 минут.
За счет его безвредности, цитологический метод незаменим для оценки динамики морфологических изменений в клетках опухоли во время лечения, для определения терапевтического эффекта проводимого лечения. Для таких пациентов он имеет несомненные преимущества перед другими, более инвазивными методами исследования.
Методы цитологических исследований постоянно совершенствуются. Развитие эндоскопической техники позволяет целенаправленно получать материал для исследования из внутренних органов, ранее недоступных для морфологического анализа без оперативного вмешательства.
Таким образом, цитологическое исследование, благодаря сочетанию высокой информативности, безвредности для пациента и скорости проведения, при отсутствии травматизации тканей, имеет огромное значение в онкологии.
Авторская публикация:
Михетько Андрей Александрович
заведующий лабораторией цитологии НМИЦ онкологии им.Н.Н. Петрова,
врач клинической лабораторной диагностики (цитолог) высшей квалификационной категории, кандидат медицинских наук.
Сравнительная оценка обычного цитологического исследования, исследования по Папаниколау и жидкостной цитологии
Основой цитологической диагностики является изучение состава клеток, их расположение и строение.
Материалом для исследования служит цитологический мазок, который содержит клетки и внеклеточный компонент.
При проведении обычного цитологического анализа препарат наносят тонким слоем на сухое стекло, высушивают на воздухе и отправляют в лабораторию для исследования. Готовят препарат вручную, придерживаясь стандартных правил приготовления образца.
Цитологическое исследование по Папаниколау
Пап-тест — это цитологическое исследование, которое применяется для диагностики заболеваний шейки матки. Пап-тест входит в программу скрининга рака шейки матки.
Материалом для исследования является цитологический мазок. Алгоритм его диагностики такой же, как у обычного цитологического исследования. Однако для проведения ПАП-исследования используется другой способ фиксации и окрашивания. Образец, который только что нанесли на стекло, быстро фиксируют спиртом. После производится серия окрашиваний. Влажная фиксация позволяет сохранить клетки в неизменном виде, что способствует лучшей их дифференцировки.
Жидкостная цитология — это метод приготовления препаратов из клеточной взвеси.
Основное отличие метода заключается в том, что после взятия материал помещается в жидкую среду, которая стабилизирует клетки. Образцы центрифугируют и из них готовят цито-препараты, которые представлены «отмытыми клетками». В методике приготовления препарата используются иные красители, поэтому цитологические морфологические критерии отличаются от тех, которые приняты по методу Папаниколау.
Жидкостная цитология имеет ряд преимуществ:
В методике приготовления препарата используются иные красители, поэтому цитологические морфологические критерии отличаются от тех, которые приняты в методе Папаниколау.
Нельзя забывать о важном моменте. При приготовлении мазков жидкостной цитологии из образца удаляется детрит, элементы воспаления, слизь, эритроциты. С одной стороны, это позволяет рассмотреть морфологию клеток с атипией более пристально, с другой стороны диагностическая значимость уменьшается.
В каждом случае врач делает назначения индивидуально. Поэтому в случае отсутствия в лаборатории того или иного метода лучше будет проконсультироваться с врачом. Специалист сможет учесть все особенности анамнеза, жалоб, диагностические возможности и определить какое цитологическое исследование необходимо выполнить.
Цитологическая диагностика заболеваний шейки матки
Цитологическое исследование мазков из шейки матки позволяет оценить состояние слизистой оболочки, наличие или отсутствие признаков патологических процессов (реактивных, предопухолевых, опухолей). При выявлении другими лабораторными методами инфекционного агента (вирус папилломы человека, бактериальные и паразитарные инфекции), цитологический метод позволяет оценить реакцию организма на инфекционный агент, наличие или отсутствие признаков повреждения, пролиферации, метаплазии или трансформации эпителия. Возможно также при исследовании мазка определить причину изменений эпителия (наличие воспаления с ориентировочным или уверенным определением патогенной микробиоты (микрофлоры), патологических процессов, связанных с гормональным, лекарственным, механическим, лучевым воздействием на организм женщины и шейку матки, состояний, чреватых опасностью возникновения дисплазии и рака шейки матки, а при их развитии установить правильный диагноз. В связи с этим цитологическое исследование применяют как при скрининге (мазки с визуально нормальной шейки матки), так и при наличии видимых при гинекологическом осмотре изменений слизистой оболочки.
Получение материала
Рак шейки матки чаще всего развивается в зоне трансформации, ему предшествуют фоновые процессы и внутриэпителиальные поражения (дисплазия эпителия), которые могут располагаться на небольших участках, поэтому важно, чтобы материал был получен со всей поверхности шейки матки, особенно из зоны стыка плоского и цилиндрического эпителия. Число измененных клеток в мазке бывает различным, и если их мало, то увеличивается вероятность, что патологические изменения могут быть пропущены при просмотре препарата. Для эффективного цитологического исследования необходимо учитывать:
Материал из шейки матки должен брать врач-гинеколог или (при скрининге, профилактическом осмотре) хорошо обученная медицинская сестра (акушерка).
Важно, чтобы в мазок попадал материал из зоны трансформации, так как около 90% опухолей исходит из зоны стыка плоского и цилиндрического эпителия и зоны трансформации и только 10% из цилиндрического эпителия цервикального канала.
С диагностической целью материал получают раздельно из эктоцервикса (влагалищной порции шейки матки) и эндоцервикса (цервикального канала) с помощью шпателя и специальной щетки (типа Cytobrush). При проведении профилактического осмотра используют Cervex-Brush, различные модификации шпателя Эйра и другие приспособления для получения материала одновременно из влагалищной части шейки матки, зоны стыка (трансформации) и цервикального канала.
Перед получением материала шейку матки обнажают в “зеркалах”, дополнительных манипуляций не проводят (шейку не смазывают, слизь не удаляют; если слизи много – ее аккуратно снимают ватным тампоном, не надавливая на шейку матки.). Щетку (шпатель Эйра) вводят в наружный зев шейки матки, осторожно направляя центральную часть приспособления по оси цервикального канала. Далее ее наконечник поворачивают на 360° (по часовой стрелке), достигая тем самым получения достаточного числа клеток из эктоцервикса и из зоны трансформации. Введение инструмента выполняют очень бережно, стараясь не повредить шейку матки. Затем щетку (шпатель) выводят из канала.
Приготовление препаратов
Перенос образца на предметное стекло (традиционный мазок) должен происходить быстро, без подсушивания и потери прилипших к инструменту слизи и клеток. Обязательно перенести на стекло материал с обеих сторон шпателя или щетки.
Если предполагается приготовление тонкослойного препарата с помощью метода жидкостной цитологии, головку щетки отсоединяют от ручки и помещают в контейнер со стабилизирующим раствором.
Фиксация мазков выполняется в зависимости от предполагаемого метода окрашивания.
Окрашивание по Папаниколау и гематоксилин-эозином наиболее информативны в оценке изменений эпителия шейки матки; любая модификация метода Романовского несколько уступает этим методам, однако при наличии опыта позволяет правильно оценить и характер патологических процессов в эпителии и микрофлору.
Клеточный состав мазков представлен слущенными клетками, находящимися на поверхности эпителиального пласта. При адекватном получении материала с поверхности слизистой оболочки шейки матки и из цервикального канала в мазок попадают клетки влагалищной порции шейки матки (многослойный плоский неороговевающий эпителий), зоны стыка или трансформации (цилиндрический и, при наличии плоскоклеточной метаплазии, метаплазированный эпителий) и клетки цервикального канала (цилиндрический эпителий). Условно клетки многослойного плоского неороговевающего эпителия принято делить на четыре типа: поверхностные, промежуточные, парабазальные, базальные. Чем лучше выражена способность эпителия к созреванию, тем более зрелые клетки попадают в мазок. При атрофических изменениях на поверхности эпителиального пласта расположены менее зрелые клетки.
Интерпретация результатов цитологического исследования
Наиболее распространенная в настоящее время – классификация Bethesda (The Bethesda System), разработанная в США в 1988 г, в которую вносили несколько изменений. Классификация создана для более эффективной передачи информации из лаборатории врачам клинических специальностей и обеспечения стандартизации лечения диагностированных нарушений, а также последующего наблюдения за больными.
В классификации Bethesda выделяют плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой и высокой степени (squamous intraepithelial lesions of low grade and high grade – LSIL и HSIL) и инвазивный рак. Плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой степени включают изменения, связанные с папилломавирусной инфекцией и слабой дисплазией (CIN I), высокой степени – умеренную дисплазию (CIN II), тяжелую дисплазию (CIN III) и внутриэпителиальный рак (cr in situ). В этой классификации имеются также указания на специфические инфекционные агенты, вызывающие заболевания, передавае мые половым путем.
Для обозначения клеточных изменений, которые трудно дифференцировать между реактивными состояниями и дисплазией предложен термин ASCUS – atypical squamous cells of undetermined significance (клетки плоского эпителия с атипией неясного значения). Для клинициста этот термин мало информативен, однако он нацеливает врача на то, что данная пациентка нуждается в обследовании и/или в динамическом наблюдении. В классификацию Bethesda в настоящее время введен также термин NILM – no intraepithelial lesion or malignancy, объединяющий норму, доброкачественные изменения, реактивные изменения.
Так как данные классификации используются в практике врача-цитолога, ниже приведены параллели между классификацией Bethesda и классификацией, распространенной в России (Табл. 22). Цитологическое стандартизованное заключениепо материалу из шейки матки (форма № 446/у), утверждено приказом Минздрава России от 24.04.2003 № 174.
Причины получения неполноценного материала различны, поэтому цитолог перечисляет типы клеток, обнаруженные в мазках и по возможности указывает причину, по которой материал признан неполноценным.
(CITO) Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой (5DIFF)
Анализ можно сдать только по адресу: ул. Новослободская, д. 14/19 стр.1
Выполняется в будни с 10:00 до 18:00 в Сб с 10:00 до 16:00
Добавить в корзину
Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой (5 diff) — это базовое лабораторное исследование, которое позволяет оценить количество клеток (абсолютные показатели), форму, размер, включения, соотношение форменных элементов (относительные показатели, %).
В данное исследование не входит определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Микроскопия мазка крови выполняется только при выявлении патологических изменений.
Кровь это жидкая, подвижная среда, циркулирующая по всему организму, ее элементы находятся в кроветворных органах, периферических тканях, сосудистом русле. Кровь состоит из плазмы и форменных элементов, которые образуются в костном мозге. Основные клетки крови — эритроциты, тромбоциты, лейкоциты. Процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов называется лейкоцитарной формулой. Среди них выделяют сегменто- и палочкоядерные клетки. 60% из них остаются в костном мозге, обеспечивая резерв, и менее 1% поступает в периферическую кровь. При лейкоцитозе редко пропорционально увеличивается количество всех видов лейкоцитов, чаще увеличивается один тип клеток, который определяется как «нейтрофилез», «лимфоцитоз», «эозинофилия». При лейкопении (снижение количества форменных элементов) используют термины: «нейтропения», «лимфопения».
Гематологические данные анализируются не абстрактно, а в конкретной связи с симптоматикой болезни, учитывая все данные. Поэтому, особенно при первичной диагностике, для получения целостной картины, информативно оценивать не отдельные клетки крови, а полный клинический анализ крови c лейкоформулой.
Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой: для чего нужен?
Показания к исследованию анализа крови с лейкоцитарной формулой:
Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой: расшифровка
Лейкоцитоз отмечается при инфекционных заболеваниях, лейкозах, инфаркте миокарда, коллагенозах (ревматизме), при воздействии токсических веществ (мышьяк, нитробензол, угарный газ), при облучении. Так же может отмечаться при беременности, после физической нагрузки, стрессе, после приема пищи.
Лейкопения отмечается при вирусных инфекциях (после лейкоцитоза указывает на угнетение кроветворения и снижение реактивности организма), гипоплазии костного мозга (агранулоцитоз, гипопластическая анемия), СКВ, приеме ряда лекарственных препаратов (сульфаниламиды).
Выделяют 5 видов лейкоцитов: нейтрофилы; эозинофилы; базофилы; моноциты; лимфоциты. Количество и соотношение этих клеток называется лейкоцитарной формулой, изменения в которой может иметь важное диагностическое значение.
Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой: о чем свидетельствует объем лейкоцитов в крови?
Изменения (сдвиг) лейкоцитарной формулы выявляют при многих патологиях, часто они не являются строго специфичными. Сдвиг лейкоформулы влево отмечается при:
Сдвиг вправо (уменьшение количества палочкоядерных нейтрофилов в сочетании с гиперсегментированными ядрами) отмечается при мегалобластной анемии; болезни почек и печени; после переливания крови.
Анализ крови с лейкоцитарной формулой: референсные значения анализа
Показатели клинического анализа крови зависят от пола, возраста, приема ряда лекарственных препаратов, беременности. Незначительные колебания показателей могут иметь суточный ритм, зависеть от физической нагрузки, стресса. Референсные значения отражаются автоматически в бланке лабораторного исследования.
Анализ крови с лейкоцитарной формулой: как проводится анализ
Данное исследование выполняется методом проточной цитометрии. Процедура взятия биоматериала на анализ в наших медицинских центрах выполняется специалистами в стерильных комфортных условиях, используется одноразовый стерильный инструментарий.
ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К АНАЛИЗАМ КРОВИ
Кровь берется из вены. Необходимо соблюдать общие рекомендации:
Цитологические исследования
Что такое цитологическое исследование?
Цитология — наука, изучающая общие черты строения и функционирования клеток и их производных. Она исследует отдельные клеточные структуры, их участие в общеклеточных физиологических процессах, пути регуляции этих процессов, воспроизведение клеток и их компонентов, приспособление клеток к условиям среды, реакции на действие различных факторов, патологические изменения клеток.
Цитологическое исследование — это оценка характеристик морфологической структуры клеточных элементов в цитологическом препарате (мазке) с целью установления диагноза доброкачественной или злокачественной опухоли и неопухолевых поражений. Оно основано на изучении с помощью микроскопа особенностей строения клеток, клеточного состава органов, тканей, жидкостей организма человека в норме и при патологических процессах. Отличие цитологического исследования от гистологического заключается в том, что изучаются не срезы тканей, а клетки; заключение основывается на особенностях изменения ядра, цитоплазмы, ядерно-цитоплазменного соотношения, образования структур и комплексов клеток.
Когда применяется цитологическое исследование?
Цитологический анализ используют при:
Материалы для цитологического исследования
Назначение цитологического анализа
Несравненные преимущества перед другими методами имеет цитологическое исследование в выявлении рака начальных стадий. Развитие эндоскопической техники, ультразвуковых методов исследования в немалой степени способствовало широкому внедрению цитологического обследования в диагностике новообразований практически из всех тканей организма, в том числе и из внутренних органов, ранее недоступных внеоперационному морфологическому анализу. Свидетельством этому является цитологическая диагностика рака желудка, легкого, мочевого пузыря и других органов при отсутствии клинических, рентгенологических и эндоскопических проявлений, еще до появления обнаруживаемых этими методами признаков.